无锡轨道二号线为东西向交通骨干线，西起青龙山南侧的梅园开原寺站，以地下线形式沿环太湖公路路向东，在梁溪路路口折向东北进入梁溪路后，再沿梁溪路向东而行，过梁湖路口，于公益中学西侧的规划路路口设荣巷站，过大池路、杜鹃路、雪松路，于桃源居西侧规划路口设置小桃源站，沿梁溪路向东行进，过青山西路于蠡溪路路口设河埒口站，与无锡地铁四号线换乘。接着在线路再穿越展西路、青祁路、于孙蒋路口设置大王基站。下穿运河西路、京杭运河、运河东路，再沿五爱路向东北，在梁溪大桥匝道北侧穿过建业路设置梁溪大桥站。随后沿五爱路向东北方向行进，在人民西路与五爱路交叉口设置五爱广场站。接着线路转向东，在人民桥北下穿古运河，横穿解放西路、健康路、石皮路转入人民中路，于中山路与人民中路交叉路口设三阳广场站，与无锡轨道交通一号线换乘。线路继续沿人民中路向东偏北前进，于解放东路和人民路交叉口设置东林广场站，线路进入人民东路后线路逐渐向南偏移，在亭子桥南侧下穿古运河、工艺路、兴源路、沪宁铁路、沪宁城际铁路和部分民房，进入上马墩路，在振奋路口设置上马墩站。随后沿上马墩路继续东行，在江海高架与上马墩路交叉路口设靖海站，与无锡轨道交通三号线换乘。过广南路后线路以S形反穿街区进入锡沪中路，在华东装饰城东设地下一层的广益站后，在柏庄路和锡沪西路交叉口设置柏庄站。过迎宾路、东亭路后在友谊路与锡沪中路交叉路口设东亭站，与无锡地铁五号线换乘。过东亭站后线路转为高架。线路过源泉路口，在312国道和锡沪路交叉口设置庄桥站。此后线路连续上跨312国道及沪宁高速公路，在团结路和东安路交叉口东侧设置云林站。线路沿东安路继续往东，在东安路和纺城大道交叉口东侧设置九里河公园站。线路再转向东北方向，在新锡路和东安路交叉口附近设置査桥站。接着线路开始转向地下，在先锋东路和新华路之间设置映月湖公园站，与无锡地铁四号线换乘在广信路和广诚路之间设置迎宾广场站，接着在京沪高速铁路无锡东站地下设置无锡东站，与京沪高铁换乘。然后线路继续向东北行进，最后在润锡路与锡沪路交汇处设终点站安镇站。 站名地理位置换乘信息车站形式开门方向安镇站润锡路与锡沪路交汇处地下岛式左无锡东站京沪高铁无锡东站地下迎宾广场站广信路和广诚路之间映月湖公园站先锋路与新华路之间地铁4号线查桥站新西路与东安路交叉口附近高架侧式右九里河公园站东安路与纺城大道交叉口东侧云林站团结路与东安路交叉口东侧庄桥站312国道与锡沪路交叉口东侧东亭站友谊路与锡沪路交叉口地铁5号线地下侧式柏庄站柏庄路与锡沪路交叉口地下岛式左广益站华东装饰城东靖海站江海高架与上马墩路的交叉口地铁3号线上马墩站上马墩路与振奋路交叉口东林广场站解放东路与人民路交叉口三阳广场站中山路与人民中路交叉口地铁1号线地下侧式右五爱广场站五爱路与人民西路交叉口地下岛式左梁溪大桥站梁溪大桥匝道北侧穿过建业路大王基站青祁路与孙蒋路交叉口河埒口站青山西路与蠡溪路交叉口地铁4号线小桃源站桃源居西侧规划路口荣巷站公益中学西侧规划路口梅园开原寺站军民路与环太湖公路交叉口