公元前334年，亚历山大率领步兵3万，骑兵5000进入小亚细亚（在当时的东方，这实在算不上一支庞大的军队）。在格拉尼科斯河畔击败了四倍于己的波斯军队，并通过外交手段使小亚细亚的希腊城邦不战而降，顺利进入叙利亚。公元前333年在伊苏斯城同波斯皇帝大流士三世的40万大军狭路相逢，大流士第一次领教了这位军事天才的厉害，在中军被击溃的情况下仓皇逃脱，波斯军队全线溃败，连他的母亲、妻女都成了亚历山大的俘虏。
接着，亚历山大进军腓尼基的推罗，在这里遇到了顽强的抵抗，经过七个月的围攻终于奏捷。这期间，大流士曾提出分一半国土给亚历山大，以换取他的母妻和两国的和平，被亚历山大拒绝。
公元前332年，亚历山大大军占领了埃及，当地祭司和贵族授予亚历山大以“埃及法老”、“阿蒙神之子”的称号。
公元前331年，在今伊拉克北部的高加米拉平原上亚历山大大帝和大流士统帅再次展开决战。大流士号称百万的大军不敌亚历山大的军队，大流士又一次逃跑被他的部下所杀，波斯帝国从此覆灭了。
但亚历山大的征服还没结束，而后进军中亚，用三年征服了阿富汗地区又进入印度，在占领印度西北大片土地后，亚历山大的士兵的疲惫到达到了极限，不愿继续前行，亚历山大无奈只有返回了巴比仑。
“亚历山大的军队可以打败火器普遍装备之前的任何一支军队”，这个判断尽管遭到不少质疑，但亚历山大在他的时代从未被战胜过却是事实。
亚历山大在所征服的地区建立了许多希腊移民城市，现今已发现的有20多座，被称为亚历山大城，最远的达到今吉尔吉斯斯坦和印度，而最有名的是则是埃及港口亚历山大里亚，在此后两千年间一直是地中海地区的一大经济文化中心。这些希腊移民城市成为传播希腊文化的中心，使中东地区在此后几百中进入了“希腊化时代”（当然不是简单的“希腊化”，而是希腊文化与当地文化的融合）。
步入中年的亚历山大对世界仍然充满了好奇心和征服欲望。他派人考察阿拉伯半岛，在巴比仑建立码头，甚至还设想沟通里海和印度洋。在他计划中要征服的地区可能还包括印度东部、意大利、西班牙、迦太基等。但在公元前323年，一场突如其来的恶性疟疾夺走了他的生命，年仅33岁。也许这场疟疾同亚历山大的征服活动一样，深刻地改变了世界历史。亚历山大没有指定继承人，他死后帝国被几个将领瓜分
在历史上，马其顿更多的作为一个广义上的地理区名称而存在。其位于欧洲巴尔干半岛中南部地区，西临阿尔巴尼亚山地，东接罗多彼山地，北靠歇亚山脉，东南临爱琴海。地处巴尔干核心，南下地中海的门户，一直为重要的贸易和军事通道。古代马其顿帝国在此兴起，其后先后隶属于罗马帝国和奥斯曼帝国。地理上的马其顿地区分属三国。共和国，属于塞尔维亚部分，称瓦尔达尔马其顿，属于保加利亚的部分称皮林马其顿，属于希腊的部分称爱琴马其顿。
马其顿地区包括从前南斯拉夫独立出来的马其顿共和国、希腊北部的马其顿地区(包括中马其顿、西马其顿、东马其顿-色雷斯)，以及保加利亚的西南角。